LPS温控凝胶法改良角膜基质炎动物模型

来源 :第十二届全国角膜及眼表疾病学术大会暨第四届全国角膜屈光手术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jazz988
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  目的:利用Poloxamer在特定浓度下的温度敏感性(即低温为液态,温度上升后可转化为高粘滞性凝胶),采用基质内注射LPS温控凝胶法对传统的造模方法做出改良,建立一种稳定、可靠、持久的角膜基质炎动物模型.方法:利用Poloxamer配制LPS温控凝胶与传统的LPS水溶液作对比,进行兔角膜基质内注射,探讨、评分炎症的各项指标,对此方法建立的角膜基质炎动物模型做出评价.成年雄性新西兰大白兔随机分为2组,采用29G微量注射器进行兔右眼角膜中央浅基质层内注射0.02%LPS水溶液或含Poloxamer的0.02%LPS凝胶,均为20ul,以注射区微隆起、角膜基质局限性变白作为注射成功标志;水溶液组为对照组,凝胶组为实验组;注射后24h、3d、7d、 14d为观察点.首先在各时间点显微镜下照相,依据炎症的浸润程度、新生血管生长的状态进行评分;其次在各时间点每组随机选取2只家兔处死后取角膜组织固定、冰冻切片后行常规HE染色做炎性细胞计数,并以NF-KB和MIP-1为检测指标进行免疫荧光染色,IPP6.0图像分析软件计算其阳性蛋白平均光密度值.各组指标做SPSS统计学分析,P<0.05有显著性差异.结果:实验组炎症反应明显强于对照组,造模成功率100%,对照组80%;对照组3d后炎症反应迅速消失,实验组3d后炎症反应存在并持续加重,7d可见明显的炎性浸润.在24h、3d时两组模型显微镜下观察、HE炎性细胞计数以及免疫荧光半定量分析无显著性差异(P>0.05);在7d、 14d两组上述三项指标对比均有显著性差异(P<0.05),实验组明显高于对照组.结论:利用LPS温控凝胶基质内注射的改良角膜基质炎动物造模方法稳定、可靠、持久,为今后的科学研究提供了良好的基础.
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