【摘 要】
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哺乳动物卵泡发育包括卵泡的生长和卵泡闭锁。卵泡的闭锁主要是由颗粒细胞的凋亡导致。本研究通过体外培养小鼠卵巢颗粒细胞,利用免疫组化、免疫荧光、RNA干扰、western blot、real time PCR、ELISA检测、流式细胞仪检测等方法,研究HERP对小鼠颗粒细胞类固醇激素的分泌、凋亡和周期的调控及其机制,揭示HERP通过对颗粒细胞的调控参与对卵泡发育和闭锁的调控机制。本实验分为四个部分:实
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哺乳动物卵泡发育包括卵泡的生长和卵泡闭锁。卵泡的闭锁主要是由颗粒细胞的凋亡导致。本研究通过体外培养小鼠卵巢颗粒细胞,利用免疫组化、免疫荧光、RNA干扰、western blot、real time PCR、ELISA检测、流式细胞仪检测等方法,研究HERP对小鼠颗粒细胞类固醇激素的分泌、凋亡和周期的调控及其机制,揭示HERP通过对颗粒细胞的调控参与对卵泡发育和闭锁的调控机制。本实验分为四个部分:实验一,HERP在小鼠卵巢组织中的时序表达和定位分布;实验二,小鼠Herp基因shRNA干扰慢病毒载体的构建;实验三,HERP对小鼠卵巢颗粒细胞类固醇激素的分泌、凋亡和周期的调节作用;实验四,HERP在赤霉烯酮引起的颗粒细胞凋亡和自噬中作用机制初步研究。研究结果表明,HERP主要表达在卵泡颗粒细胞上并在发情周期中呈现一定规律变化;通过有效抑制HERP在颗粒细胞中的表达,我们发现HERP能够促进细胞周期以及抑制颗粒细胞雌激素的分泌;在赤霉烯酮诱导细胞凋亡过程中,HERP能够通过抑制自噬促进颗粒细胞的凋亡。
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