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目的:探索和建立人真皮成纤维细胞体外培养所需最低血清浓度的方法。
方法:采用胶原酶消化法,在不同血清浓度(体积分数10%、5%、2%)的培养基进行条件培养。苏木素-伊红染色后观察成纤维细胞形态以及波形蛋白免疫组化鉴定,MTT法进行细胞计数,流式细胞仪对细胞生长周期进行检测。
结果:分离的成纤维细胞在3种条件培养基中的生长状态有所不同:含10%、5%血清相对与2%血清的条件培养基下成纤维细胞生长增殖迅速,细胞活力强,MTT值明显增高(P<0.05),细胞周期G1/S期比例降低(P<0.01);5%与10%组均无显著性差异(P>0.05)。
结论:5%自体血清浓度的条件培养下可获得活力强,增殖能力旺盛的人真皮成纤维细胞。