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目的：生物信息学分析和我们的前期研究显示，miR-466a/b/c/e-5p/和miR-466a/b/c/e-3p分别具几乎完全相同的成熟miRNA序列，可能可以在肾髓质中对渗透调控转录因子OREBP/NFAT5进行转录后表达调控。我们因此研究了miR-466a在转基因小鼠中的过表达对小鼠。肾组织OREBP/NFAT5的表达和小鼠尿液浓缩机制的影响。方法：通过PCR从鼠基因组中扩增miR-466a基因序列，将片段插入鸡β-actin promoter下游构建过表达质粒pBact-miR-466a，然后将转基因片段酶切出来用于显微注射受精卵制备FVB遗传背景的转基因小鼠。小鼠基因型鉴定通过剪尾巴提取基因组DNA进行PCR分析。通过Real-time RT-PCR或Western blotting分析miR-466a5p/3p、OREBP/NFAT5、AR、SMIT、AQPs、UTAs等在转基因小鼠肾皮质和髓质中的表达。利用代谢笼测定8周龄野生型(WT)和miR-466a转基因小鼠的水摄入量和尿液排放，测定尿液中钠离子、钾离子、氯离子、尿素、肌酸酐等溶质含量。尿浓缩能力是采用对雄性8周龄WT和miR-466aTg1小鼠腹腔注射0.4μg/kg去氨加压素(dDAVP)，收集注射药物前和注射dDAVP后的尿液以分析尿液渗透压变化。结果：我们已成功制备两个品系的miR-466a转基因小鼠。Real．time RT-PCR分析发现其中一个品系(miR-466aTg1)小鼠的肾脏皮质和髓质中miR-466a-5p/3p表达量较W小鼠有非常显著的提升，而肾皮质和髓质中OREBP/NFAT5显著下调了25-30％(p<0.01)。在miR-466aTgl肾髓质中，AQP2、AQP3和UTA2有显著的下调，而AR、AQP1、UTA1和UTA3/5却有不同程度的上调。同时，注射dDAVP前后的miR-466aTg1小鼠的尿液渗透压均较相应的wT对照小鼠低约500mOsmol/kg(p<0.01)，miR-466aTg1小鼠尿液中多种溶质含量也较WT小鼠尿液均有所下降。结论：miR-466a在转基因小鼠中的过表达显著抑制了渗透调控转录因子OREBP/NFAT5及其靶基因的表达，从而显著影响了小鼠的尿液浓缩机制。miR-466a/b/c/-5p/3p因而是一组肾渗透调控和尿液浓缩机制的重要调控基因。