【摘 要】
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以往对神经干细胞(NSCS)凋亡的研究是通过流式细胞仪间接检测早期凋亡的细胞.由于神经球中细胞的突起互相缠绕,通过胰酶消化和(或)机械吹打的有损伤的方法很难把神经球吹打成单细胞悬液,并且会出现大量NSCs损伤的现象,影响数据的可靠性.为了解决这个实验难题,本研究通过机械分离方法分离胚胎大鼠海马组织,把神经干细胞球培养在共聚焦显微镜专用培养皿中.用Hoechst 33258染细胞核,免疫荧光细胞化学
【机 构】
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徐州医学院解剖学教研室 徐州 221004
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以往对神经干细胞(NSCS)凋亡的研究是通过流式细胞仪间接检测早期凋亡的细胞.由于神经球中细胞的突起互相缠绕,通过胰酶消化和(或)机械吹打的有损伤的方法很难把神经球吹打成单细胞悬液,并且会出现大量NSCs损伤的现象,影响数据的可靠性.为了解决这个实验难题,本研究通过机械分离方法分离胚胎大鼠海马组织,把神经干细胞球培养在共聚焦显微镜专用培养皿中.用Hoechst 33258染细胞核,免疫荧光细胞化学技术检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达.
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研究嗅鞘细胞及其表达的神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)对神经干细胞增殖与分化的影响.采用共培养液培养及NGF或BDNF抗体封闭的方法,观察嗅鞘细胞对孕12 d大鼠中脑神经干细胞增殖与分化的影响.免疫组织化学和RT-PCR半定量分析嗅鞘细胞表达的细胞因子及其受体的情况.行神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学检测,并观察NSCs增殖与分化.
在心肌微环境下,诱导含有NKX2-5基因的骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化,是一个有临床应用前景的实验研究.本实验采用了转染NKX2-5基因的MSCs细胞和乳鼠心肌细胞共培养,以免疫细胞化学法检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)在MSCs中的表达和HE染色法观察F1、F2、F3细胞的形态和蛋白表达.统计学分析,检验水准取α=0.05,当P＜0.05时认为有显著差异.
肌腱病的发病率极高,严重影响人们的日常生活,主要临床表现为肌腱或腱-骨接合部的疼痛甚至断裂.肌腱病的发病机制不详,普遍认为与肌腱急慢性损伤有关.现治疗方法很多,其中局部注射富血小板血浆(PRP)倍受患者欢迎.有入经临床试验发现PRP能有效治疗肌腱病,也有人指出PRP对肌腱病无益.
观察基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员自体骨髓干细胞归巢急性心肌梗死区及超微结构变化.本实验用SD大鼠30只,随机分为rhG-CSF动员组(动员组)、心肌梗塞模型组(模型组)、假手术组,每组10只.动员组于术前3d皮下注射rhG-CSF 50 μg·Kg-1·d-1;模型组和假手术组皮下注射等量生理盐水.
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探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)体外诱导造血干细胞(HSC)衰老的可能机制.免疫磁性分选法分离纯化小鼠HSC,与ox-LDL共培养,采用β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老HSC,流式细胞术检测HSC细胞周期分布,混合集落培养(CFU-Mix)检测HSC混合集落形成能力.流式细胞术和免疫荧光检测HSC产生活性氧(ROS)的量,酶学比色法检测HSC培养上清液超氧化物歧化酶(SOD)、谷
Great success has been reported that platelet lysate (PL) derived from human adult blood is an alternative to FBS for large-scale expansion of human mesenchymal stem cells (MSC) for future therapeutic
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