维生素E水平对滩羊不同组织α-TTP基因mRNA表达量的影响

来源 :中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ssttll
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  动物对维生素E的利用需要经过肠道的吸收、血液脂蛋白的转运及肝脏的调控.而α-生育酚转移蛋白(α-TTP)是一种把 α生育酚从肝脏转运到极低密度脂蛋白的存在于肝脏细胞液中一种蛋白.因此,了解α-TTP基因在绵羊体内各组织的存在和表达情况,有利于进一步的研究动物机体对维生素E的吸收、转运和代谢过程.本试验旨在研究不同添加水平维生素E对滩羊不同组织α-TTP基因mRNA表达的影响.在银川宁夏鲁宁小尾寒羊种羊中心,选择健康无病的断奶后20 ~ 30天的滩羊公羊35只,随机分为5个处理组,对照组饲喂基础日粮,不添加维生素E;试验组维生素E的添加剂量分别为20IU/只·天、100IU/只·天、200IU/只·天、2 000IU/只·天.采用单槽饲养,饲养期为4个月,饲养结束后每个处理组随机选择3只羊屠宰后分别迅速采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织样品,并于液氮速冻后转移至-80℃保存,用于提取总RNA.用Trizol法提取所有羊只各组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏)的RNA,并根据本课题组上传到GenBank上的绵羊 α-TTP序列(GenBank:HQ268507.1),通过Primer Premier 5.0软件来设计引物(产物扩增长度为602bp),通过反转录、PCR扩增α-TTP目的基因.然后根据GenBank上的绵羊α-TTP序列设计荧光定量用引物,并采用SYBR Green染料法在Roche LightCycler(R)480Ⅱ实时荧光定量PCR扩增仪上进行扩增.以β-actin管家基因作为内参,对α-TTP基因进行相对定量分析,目的基因表达量以2-△△CT表示.采用SAS9.1统计软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),Duncan氏法进行组间多重比较,以P<0.05表示差异显著.试验表明:(1) α-TTP基因在肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏均有表达,并且对照组肝脏组织α-TTP基因mRNA表达量极显著高于心脏、脾脏、肺脏和肾脏组织(P<0.01);(2)肝脏和肺脏组织中,200IU/只·天处理组α-TTP基因mRNA表达量均显著高于2 000IU/只·天处理组(P<0.05);脾脏组织中,200IU/只·天处理组α-TTP基因mRNA表达量显著高于100IU/只·天处理组(P<0.05);与此相反,心脏组织中,200IU/只·天处理组α-TTP基因mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05);肾脏组织中,维生素E添加量对α-TTP基因mRNA表达量没有显著影响(P>0.05).饲粮维生素E添加量对滩羊不同组织的α-TTP基因mRNA表达量有一定的影响,并且组织间存在差异.
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