多种化学致敏物对THP-1巨噬细胞细胞因子表达的影响

来源 :中国毒理学会第六届全国毒理学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:itsmoreaaron
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  目的 探讨多种化学致敏物作用于THP-1源性巨噬细胞后,细胞上清液中细胞因子表达的变化,为确定化学物是否具有致敏性提供更有效的参考指标,从而减少职业人群中化学致敏物的接触,有效的预防过敏性疾病的发生.方法 首先将人单核细胞株THP-1细胞用佛波酯(PMA,0.1 mg·L-1)诱导72 h,使之转化为具有贴壁能力的THP-1巨噬细胞.选择硫酸镍(NiSO4)、2,4-二硝基氯代苯(DNCB)、苯二胺(PPDA)、重铬酸钾(K2Cr2O4)、甲苯二异氰酸酯(TDI)5种化学致敏物和十二烷基磺酸钠(SDS)、异丙醇(IPA)2种非化学致敏物为受试物,检测不同浓度受试物处理细胞的不同时间点时细胞因子表达的变化.分别用ELISA法检测细胞培养上清中IL-6和TNF-α的水平,用流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测IL-1β和IL-8细胞因子的表达水平.结果 5种化学致敏物均能引起IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-8的表达升高,不同的致敏物诱导细胞分泌细胞因子表达的时间并不相同,NiSO4,DNCB,K2Cr2O4作用6h,PPDA,TDI作用12h时,THP-1细胞上清中IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-8四种细胞因子的表达量最高.NiSO4,DNCB和TDI组细胞上清中IL-1β,TNF-α和IL-8表达量增加并呈剂量反应关系.K2Cr2O4,PPDA组IL6,IL-8表达升高且有剂量反应关系.5种化学致敏物NiSO4,DNCB,K2Cr2O4,PPDA,TDI在最适时间点最适浓度刺激细胞分泌IL-6的水平分别为对照组的40,25,20,50和50倍,TNF-α水平为对照组的20,12,20,8和5倍,IL-1β水平为对照组的30,60, 25,30和45倍,IL-8水平为对照组的15,12,15,12和7倍;非致敏物SDS与IPA处理组IL-6水平均有升高,其中SDS组升高最明显,且呈明显的剂量反应关系,SDS高剂量组(1 mg·L-1)IL-6含量约为空白对照组的30倍左右,因此提示IL-6指标不能作为评价致敏物的有效指标.TNF-α,IL-1β和IL-8表达水平无明显变化,因此TNF-α,IL-1β和IL-8这三个指标可作为评价化学物致敏性的有效标记.结论 THP-1巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-8受化学致敏物的影响,但不受非致敏物的影响.因此这3个指标可作为鉴别化学致敏物和非致敏物的有效参考指标.
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