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HCV作为一种RNA病毒,能够有效激活宿主固有免疫系统中IFN诱导信号通路,但同时HCV又通过拮抗天然免疫系统识别,干扰IFN信号通路以及抑制IFN刺激基因活化等多水平逃逸机制来逃避宿主的抗病毒活性.MAVS为IFN信号通路中一个非常重要的信号分子,HCV NS3/4A可在邻近线粒体结构域的508位Cys切割MAVS,破坏MAVS的线粒体定位,抑制RIG-I信号通路诱导的IFN-beta活化.在本研究中,利用NS3/4A丝氨酸蛋白酶切割MAVS的特性,以eYFP及SEAP为报告基因,基于eYFP-MAVS激活IFN-beta-SEAP的信号通路,建立了一个高灵敏的NS3/4A丝氨酸蛋白酶活性监测细胞模型.正常情况下,带有eYFP报告基因的eYFP-MAVS定位于细胞线粒体上,可激活IFN-beta启动子介导的SEAP的表达.共表达NS3/4A时,eYFP-MAVS被水解,其定位由线粒体转移到细胞浆中,从而阻断了eYFP-MAVS对IFN-beta-SEAP的激活作用.研究证明SEAP活性的下降与NS3/4A蛋白酶的表达量成正比.使用IFN-o.处理HCV复制细胞,NS3/4A的表达量下降,SEAP活性上调.随后,我们使用此报告基因体系对CsA和CsA&IFN-α联合用药的抗HCV活性进行了分析,证明此体系可用于抗HCV药物的筛选.