【摘 要】
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苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)的杀虫晶体蛋白因其对各种害虫具有较高的专杀活性,并且对高等脊椎动物无毒性而被广泛的应用于转基因的作物开发.但是当下转基因遇到瓶颈就是抗性产生的问题,通过多价转基因策略延缓抗性被广泛采纳.cry5Ba1 和cry6Aa1 已经被成功应用于转基因番茄应对南方根结线虫(M.incognita)造成的病害.但是前瞻性的设计抗根结线虫多价转基
【机 构】
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华中农业大学,湖北武汉430013
【出 处】
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第六届全国农业微生物研究及产业化研讨会、第十五届全国杀虫微生物学术研讨会、第十一届全国虫生真菌学术研讨会
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苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)的杀虫晶体蛋白因其对各种害虫具有较高的专杀活性,并且对高等脊椎动物无毒性而被广泛的应用于转基因的作物开发.但是当下转基因遇到瓶颈就是抗性产生的问题,通过多价转基因策略延缓抗性被广泛采纳.cry5Ba1 和cry6Aa1 已经被成功应用于转基因番茄应对南方根结线虫(M.incognita)造成的病害.但是前瞻性的设计抗根结线虫多价转基因的备选基因时需要更多的不同的Cry 蛋白.我们通过对Cry5Ba1 有抗性的Bre突变体线虫生测检验,发现两个克隆的Cry5 类新杀线虫晶体Cry5Ca1 和Cry5Da1蛋白呈现不同的效果,Bre 抗性品系中Bre-1、Bre-3、Bre-4 和Bre-5 突变体秀丽小杆线虫仍对Cry5Da1 保持敏感性,证明Cry5Ca1 和Cry5Da1 不具有交叉抗性,；并且Cry5Ca1 还能和Cry5Da1 协同性的增加对N2 的活性进一步印证不同的受体结合位点.通过糖封闭实验证明Cry5Da1 是具有结合不同与Cry5Ba1 鞘糖脂受体的含半乳糖苷表位结构的特性.研究发现Cry5Ca1 和Cry5Da1 之间Domain Ⅱ序列相似性低,以及Domain Ⅱ的进化关系远,结合糖的motif 和高级结构差异大,这些特性是与不同结合受体特性呈正相关的.针对抗根结线虫多价转基因设计时的准则,提出了不仅要考虑Domain Ⅱ 的序列相似度,还要包括结构相似性,协同增效性等特征.
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