【摘 要】
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粘附素(aha1)、气溶素(aerA)和细胞兴奋性肠毒素(alt)是气单胞菌的主要毒力因子.根据aha1、aerA和alt基因序列设计三对引物建立了可同时检测三种毒力基因的多重PCR方法(MPCR)
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036
【出 处】
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中国水产学会鱼病学专业委员会第六次会员代表大会暨国际学术讨论会
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粘附素(aha1)、气溶素(aerA)和细胞兴奋性肠毒素(alt)是气单胞菌的主要毒力因子.根据aha1、aerA和alt基因序列设计三对引物建立了可同时检测三种毒力基因的多重PCR方法(MPCR).该方法扩增出气单胞菌的aha1大小为1087bp,aerA为721bp,alt为480bp,其敏感度为102cfu.mL-1.而对金黄色葡萄球菌、恶臭假单胞菌、拟态弧菌以及非致病性气单胞菌均未扩增出任何条带.用限制性内切酶EcoRV、BamHⅠ和FbaⅠ分别酶切PCR扩增产物,均获得与预期一致的酶切图谱.用建立的MPCR对15株水生动物源气单胞菌安徽分离株进行毒力基因检测,结果显示在13株致病性气单胞菌中10株细菌的毒力基因型为alt+ahal+aerA+,2株为alt+ahal-aerA-,1株为alt+aha1+aerA-;alt、aha1和aerA基因在气单胞菌中的携带率分别为100％、84.62％和76.92％.表明气单胞菌安徽分离株的主要毒力基因型是alt+ahal+aerA+的高毒力表型,alt毒力基因普遍存在于不同表型种气单胞菌中.
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