miR-21a-5p对PHEV复制的影响及其靶基因Caskin1的验证

• 作 者: 吕晓玲;贺文琦;高丰;赵魁;李姿;胡诗雨;
• 机 构: 吉林大学动物医学学院,长春 130062
• 出 处: 中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九届全国会员代表大会
• 发表日期: 2017年期

　　为研究PHEV 感染过程中宿主miR-21a-5p 对PHEV 复制的影响,本研究利用RT-PCR 方法对PHEV 感染过程中细胞内miR-21a-5p 的表达变化进行检测,发现miR-21a-5p的表达量明显升高。之后,将miR-21a-5p 模拟体或抑制剂转染N2a 细胞,接种PHEV 后利用RT-PCR、Western blotting 方法检测PHEV 相对表达量,结果显示抑制miR-21a-5p 的表达会使PHEV 复制增殖显著下降,反之使PHEV 表达量升高。其次,通过生物信息学软件预测miR-21a-5p 的靶基因并进行功能分析,发现参与调控突触传递、轴突导向的支架蛋白Caskin1 可能为其靶基因。双荧光素酶报告系统、RT-PCR、Western blotting 结果均证实Caskin1 为miR-21a-5p 的靶基因,并且当抑制细胞内源性Caskin1 表达后,PHEV 复制量明显升高。综上所述,在PHEV 致病过程中miR-21a-5p 可能通过靶向Caskin1 来调控病毒复制。研究结果不仅为miRNA 参与调控PHEV 复制提供数据支持,也为深入研究PHEV 的致病机制提供新的思路。