黑鲷增殖放流个体分子判别方法的建立与应用

来源 :中国水产学会渔业资源与环境分会2016年度学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zou_zm
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  随着放流规模的不断扩大,放流后实现对放流个体的准确识别已成为海洋增殖放流项目面临的主要难题之一.本研究以南海区重要放流种黑鲷为研究载体,以微卫星为分子标记,使用系谱分析技术,建立了黑鲷放流个体分子判别方法,并在放流实践中对方法进行了应用.首先,选取102尾黑鲷亲本,隔离催卵,孵化受精卵;采用“高通量测序法”开发黑鲷微卫星标记,筛选出最优标记组成“分子判别标记组”,并对亲本群体进行等位基因分型.将分型数据输入系谱分析软件Cervus,进行模拟判别,以评估标记组的判别能力,确定判别标准;之后,将黑鲷幼鱼培育至放流规格,在大亚湾进行了放流,并在约半年后进行回捕.最后,使用上述标记组和判别标准完成对回捕群体中放流个体的判别.结果 ,通过高通量测序共获得黑鲷微卫星序列9125条,设计PCR引物180对,经筛选最终获得多态性黑棘鲷微卫星标记47个;从中精选出13个标记,组成“分子判别标记组”;模拟识别的结果表明,“分子判别标记组”即使在7%分型错误(人为误差)下,识别准确率仍能达到97%,证明此标记组具有充足的分子判别能力,并确定LOD临界值为7.19;使用该临界值为判别标准,在240尾回捕个体中共识别出7尾放流个体,放流个体占比为2.92%.本研究可为黑鲷及其它海洋生物增殖放流效果的准确评估提供技术基础.
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