拟穴青蟹组织微生物多样性与蜕壳关系的研究

来源 :第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pengguanxin
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  本研究以将要蜕壳的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)为研究对象,研究青蟹蜕壳后不同时间段的肠道(前肠、中肠、后肠)、肝胰腺、鳃和表皮中的微生物含量和微生物物种多样性及组成。取健康的雄性青蟹放入清洗消毒后的养殖盒中空腹暂养3天,后期饲喂灭菌的红肉河蓝蛤、田螺等,每天投喂量为体重的10%。分别取蜕壳后的雄性青蟹第0,3,6,15天组织进行研究,每组取10个重复。甲醛溶液(3%甲醛,2% NaCl)过夜固定,SYBR Green Ⅰ染色,荧光显微镜下观察计数;同时提取各组织中微生物总DNA进行16S rDNA文库构建以及Illunima高通量测序研究各组织菌群结构;同时测定水体中微生物含量及提取水体微生物的DNA,以监测养殖水体微生物含量及多样性。初步实验结果表明,拟穴青蟹内包括肠道内容物和肠壁上的微生物总和含量约108-109个/g,鳃的微生物含量约为107-108个/g,甲壳内皮微生物含量约为106-107个/g,以及肝胰腺微生物含量约为106-107个/g;对此,我们对青蟹体内各组织微生物含量有了初步的了解,为后续甲壳类微生物组的研究提供了参考。
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