异柠檬酸脱氢酶的酶动力学研究

• 作 者: 樊晶[1]张孝山[1]袁玉华[1]李玉运[1]王学谦[2]
• 机 构: 天津市血液中心 300110
• 出 处: 第三届华北三省两市检验医学学术会议
• 发表日期: 2006年期

(目的)研究异柠檬酸脱氢酶(ICD)的酶动力学特点并确定异柠檬酸脱氢酶活性测定技术。
(方法)建立异柠檬酸脱氢酶(ICD)测定异柠檬酸盐的方法，通过研究ICD的反应曲线、最适PH及在最适PH下测定的米氏常数(Km)，确定其酶动力学特点。
(结果)观察ICD酶反应曲线，未见明显的延迟现象；配置Tris-HCL缓冲液，可见反应在PH=8.43时，ICD反应速度达到顶峰，为最适PH；并在此最适PH下多次以异柠檬酸钠为底物时测得米氏常数值为0.297±0.042 mmol/L。
(结论)所建立的异柠檬酸脱氢酶活性测定技术，能成功地在检验科大生化仪(AU400)应用，该技术可用于今后涉及生物氧化-三羧酸循环中柠檬酸到异柠檬酸的代谢步骤各物质的检测，具有一定的实用价值。