【摘 要】
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目的：通过检测宫颈癌组织和正常组织间sift 3基因的表达,探讨sirt 3在宫颈癌中的表达水平及其可能发挥的作用,并通过体外功能研究进一步探寻sift 3在宫颈癌致病过程中的作用机制,为拓展宫颈癌的诊治靶点奠定基础.方法：收集正常宫颈组织24例及宫颈鳞癌组织48例,提取组织总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法检测Sirt3基因mRNA水平,并比较组织间表达差异.选取Siha细胞株,采用siR
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目的：通过检测宫颈癌组织和正常组织间sift 3基因的表达,探讨sirt 3在宫颈癌中的表达水平及其可能发挥的作用,并通过体外功能研究进一步探寻sift 3在宫颈癌致病过程中的作用机制,为拓展宫颈癌的诊治靶点奠定基础.方法：收集正常宫颈组织24例及宫颈鳞癌组织48例,提取组织总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法检测Sirt3基因mRNA水平,并比较组织间表达差异.选取Siha细胞株,采用siRNA干扰下调sirt3的表达水平,采用realtime PCR和western Blot的方法检测Sirt 3的mRNA和蛋白水平,同时检测HPV16 E6、E7 mRNA的表达水平改变.采用western blot的方法检测sirt 3的蛋白表达水平及TERT基因表达水平.CCK8的方法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测凋亡,同时采用β半乳糖苷酶染色法进行细胞衰老检测.结果：比较24例正常宫颈组织和48例宫颈癌病灶组织Sirt3 mRNA表达水平,发现Sirt 3 mRNA在宫颈癌中表达较正常组织明显升高(P＜0.05).采用siRNA干扰Siha细胞Sirt 3基因的表达,干扰组蛋白水平下调达90±11％. Sift 3表达下调显著抑制了细胞的增殖能力(P=0.022),细胞凋亡显著增加(P=0.002).同时Sift 3表达下调组TERT基因的蛋白水平明显减低,而细胞内HPV 16 E6和E7的mRNA水平无明显改变.细胞衰老检测衰老细胞染色的细胞所占百分比与对照组相比明显增加.结论：sirt3基因在宫颈癌组织中表达增高,在宫颈癌中发挥癌基因的作用.干扰sirt3的表达抑制了细胞增殖、促进细胞凋亡,同时通过下调TERT基因的表达和促进细胞衰老发挥作用.Sift3可能是潜在的宫颈癌靶向治疗的新靶点.
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