【摘 要】
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对双孢蘑菇总蛋白质的双向电泳(2-DE或2D-PAGE)条件进行了摸索与优化,建立了双孢蘑菇蛋白质的2D-PAGE技术,获得了清晰的2D-PAGE图谱.结果表明双孢蘑菇的蛋白质大部分集中
【机 构】
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福建省农业科学院食用菌研究所福州350014
【出 处】
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中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会
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对双孢蘑菇总蛋白质的双向电泳(2-DE或2D-PAGE)条件进行了摸索与优化,建立了双孢蘑菇蛋白质的2D-PAGE技术,获得了清晰的2D-PAGE图谱.结果表明双孢蘑菇的蛋白质大部分集中在分子量20-120KDa、等电点pI5.2-7.8的范围内.对双孢蘑菇As2796及其基质降解能力退化突变体菌株2796-3、2796-5进行了2D-PAGE分析,发现了2个明显的、可重复的差异蛋白质,在退化菌株中分别为上调和下调表达,且2个退化菌株表现一致.根据质谱(MALDI-TOF-MS)分析和数据库检索结果,2个差异蛋白质初步鉴定为肌动蛋白和NADH脱氢酶铁硫蛋白3,它们与细胞内信号传导或转录调控等过程关系密切.结合前期的胞外酶活测定、同工酶分析、mRNA差异显示(DDRT-PCR)等研究结果,提出双孢蘑菇基质降解能力退化分子机理是一个多级链式应答(逐级调控)过程的初步设想.即基质降解能力上的退化现象不是单一结构蛋白基因的变异,而可能是调控基因的变异,导致基因表达网络的改变,最终在转录水平、蛋白质水平、细胞水平及生物体上表现出系列差异,造成菌株在基质降解能力上的退化现象.该设想为进一步深入研究双孢蘑菇分解基质能力退化的分子机理奠定了良好基础.
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