【摘 要】
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根据GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒(ARV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3种病毒基因序列。设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。
【机 构】
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山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600
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根据GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒(ARV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)等3种病毒基因序列。设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上，优化三重RT-PCR反应条件，建立了3种病毒的三重RT-PCR技术，用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增，结果可同时扩增ARV的247bp，ALV的675bp，REV的467bp的特异性片段，而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明，该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证，结果显示，两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法，具有特异、快速、准确的特点，可用于对这三种病毒的同时检测和鉴别诊断。
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