【摘 要】
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抗体是由效应B淋巴细胞分泌的、具有保护作用的免疫球蛋白,在获得性免疫系统中发挥着重要的作用.B细胞受体(BCR)位于B淋巴细胞的表面,是一种能够特异性识别并结合抗原的膜表面免疫球蛋白.B细胞受体由两条重链和两条轻链组成,其中重链可变区的互补决定区3(CDR3)最具多样性.传统的测序方法无法获得庞大的抗体库的全部序列,而高通量测序的方法可以克服这一困难.目前关于猪抗体库的高通量测序方法尚无报道.本研
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抗体是由效应B淋巴细胞分泌的、具有保护作用的免疫球蛋白,在获得性免疫系统中发挥着重要的作用.B细胞受体(BCR)位于B淋巴细胞的表面,是一种能够特异性识别并结合抗原的膜表面免疫球蛋白.B细胞受体由两条重链和两条轻链组成,其中重链可变区的互补决定区3(CDR3)最具多样性.传统的测序方法无法获得庞大的抗体库的全部序列,而高通量测序的方法可以克服这一困难.目前关于猪抗体库的高通量测序方法尚无报道.本研究应用多重PCR以及高通量测序的方法获得了四只健康三周龄断奶猪的外周血淋巴细胞中的BCR重链序列的信息.数据分析结果显示平均每个样本大约获得479,876条有效序列以及304,826条独特的CDR3序列.为了对猪的抗体库拥有更全面的认识,我们进一步对BCR重链的V、D、J基因的使用,CDR3长度的分布,CDR3氨基酸序列的组成,免疫球蛋白的分型等做了详细的分析.本研究初步建立了一种基于高通量测序的研究猪的抗体库的方法,将为后续研究猪的感染与体液免疫应答打下基础.
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