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@@玉米弯孢霉叶斑病菌(Curvulaira lunata)产生的毒素和黑色素均是重要的致病因子,因此研究毒素合成相关基因Clt-l和黑色素形成相关基因Bml的相关系,有助于更全面揭弯孢霉叶斑病菌的致病机理。根据已知的Bml基因序列作为探针,通过Southem blotting确定了Bml基因以单或多拷贝的形式存在于基因组中,为此,以质粒pSilent-l为基础构建了Bml基因的RNA干扰载体pSilentBml-2,并利用原生质体-氯化钙-聚乙二醇(CaC12-PEG)转化方法获得了10个抗潮霉素的转化子,其中转化子T2、T4、T5在菌丝颜色上表现出不同程度的白化现象。通过转化子Southem blotting和RT-PCR验证,发现其干扰载体pSilent-brnl中Bml基因序列的发夹结构已经整合到基因组中。在三个干扰子中,Bml基因表达有不同程度的抑制,其中转化子T5中Bml基因表达被沉默程度达79%,菌落表现红棕色,边缘出现白化,表明DHN黑色素合成过程中受阻。另外,通过TLC检测发现T5不能够产生所鉴定的毒素分子—(甲基-(5羟甲基)呋喃-2-羧酸盐)。综上述表明:Bml基因不仅是弯孢霉叶斑病菌黑色素合成途径中关键基因,而且还参与了毒素合成代谢的调控。为了进一步明确两基因是否存在直接的互作关系,本研究正在利用酵母双杂交方法进行研究。