【摘 要】
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目的 坏死性凋亡和凋亡均可以通过死亡受体通路激活,但是目前尚不清楚它们的共调控机制,本课题拟通过建立视网膜脱离模型,研究视网膜脱离后CYLD干扰对于光感受器细胞坏死性凋亡和凋亡的共调控作用,为今后通过抑制共同上游信号传导途径,保护视功能奠定理论基础.方法 设计RNA干扰CYLD基因慢病毒载体,网膜下注射三周后建立视网膜脱离模型,分为sh-cyld组,sh-neg组和untreated组,三天后通过
【机 构】
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230001 合肥,安徽医科大学附属省立医院眼科 上海交通大学附属第一人民医院眼科
【出 处】
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2014年中国眼底病论坛暨全国眼底病专题学术研讨会
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目的 坏死性凋亡和凋亡均可以通过死亡受体通路激活,但是目前尚不清楚它们的共调控机制,本课题拟通过建立视网膜脱离模型,研究视网膜脱离后CYLD干扰对于光感受器细胞坏死性凋亡和凋亡的共调控作用,为今后通过抑制共同上游信号传导途径,保护视功能奠定理论基础.方法 设计RNA干扰CYLD基因慢病毒载体,网膜下注射三周后建立视网膜脱离模型,分为sh-cyld组,sh-neg组和untreated组,三天后通过TUNEL检测,电镜和免疫沉淀的方法,观察CYLD基因干扰后对光感受器细胞坏死性凋亡和凋亡的影响.结果 CYLD基因干扰后sh-cyld组中TUNEL阳性的光感受器细胞数(618.80±109.53/mm2)较untreated组和sh-neg组明显减少(untreated组:1409.69±282.45/mm2;sh-neg组:1390.75±208.49/mm2)(P＜0.01);同时电镜结果显示sh-cyld组中光感受器细胞的坏死样改变为13.75±1.70 ％,较untreated组和sh-neg组明显减少(P＜0.01);免疫印迹显示CYLD干扰可以增加RIP1的泛素化水平,抑制caspase8的活化和RIP1的磷酸化.结论 CYLD基因干扰后,可以降低CYLD蛋白的表达,共同抑制光感受器细胞的坏死性凋亡和凋亡,其机制为CYLD通过调控RIP1的泛素化,从而抑制caspase8的活化和RIP1的磷酸化.
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