抗Fas抗体诱导软骨细胞凋亡及IGF-1的保护作用

来源 :中国康复医学会颈椎病专业委员会第九次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hh139999
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目的:建立抗Fas抗体诱导大鼠终板软骨细胞凋亡模型,检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是否有延缓软骨细胞凋亡的作用,并进一步了解整合素β1(integrin-β1)和粘着斑激酶(FAK)的表达情况。方法:取大鼠颈椎软骨终板软骨细胞体外培养,应用抗Fas抗体(500ng/ml)和人重组IGF-1(50ng/ml)处理。光学显微镜观察细胞形态,透射电子显微镜、TUNEL法观察细胞凋亡形态,免疫组织化学法检测Bax、bcl-2表达,实时荧光定量RT-PCR、免疫组织化学和WesternBlot法检测integrin-β1和FAK表达。结果:体外培养出软骨细胞并维持其表型。抗Fas抗体诱导软骨细胞凋亡,TUNEL染色证明细胞凋亡率升高,透射电镜发现典型凋亡小体。Bcl-2表达降低而Bax表达升高,integrin-β1和FAK的基因与蛋白表达升高。抗Fas抗体联合应用IGF-1后可延缓上述软骨细胞凋亡的改变。结论:抗Fas抗体可诱导体外培养的终板软骨细胞凋亡。IGF-1能延缓抗Fas抗体诱导的软骨细胞凋亡,保护软骨细胞,抑制整合素β1和FAK的表达,维持软骨细胞的功能。
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