【摘 要】
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本研究测定了临潭株棒状体相关蛋白的多基因家族的基因序列及基因座结构.结果显示临潭株的棒状体相关蛋白(rap-1)基因座复杂的基因结构。1),存在三种rap-1基因类型(rap-1a,rap-1b and rap-1c);2),rap-1a和rap-1b包含多个基因拷贝；3),rap-1a基因存在基因多态性,包含两种rap-1a基因类型(命名为:rap-1a 61和rap-1a 67)同源性为95.
【机 构】
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INRA,UMPR1300 Biology,Epidemiology and Risk Analysis in Animal Health,BP 40706,F:44307 Nantes,France
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究测定了临潭株棒状体相关蛋白的多基因家族的基因序列及基因座结构.结果显示临潭株的棒状体相关蛋白(rap-1)基因座复杂的基因结构。1),存在三种rap-1基因类型(rap-1a,rap-1b and rap-1c);2),rap-1a和rap-1b包含多个基因拷贝；3),rap-1a基因存在基因多态性,包含两种rap-1a基因类型(命名为:rap-1a 61和rap-1a 67)同源性为95.7％,每个rap-1a类型又包含两个变异体亚型；4),rap-1a61-1和rap-1a 61-2之间的多态性是有限的,仅存在三个核苷酸位点的变异；5),rap-1a 67-1和rap-1a 67-2之间,从1270bp到rap-1a67-1基因末端存在8个核苷酸变异位点,因此产生了两种有细微差异的蛋白；6),两类rap-1a基因在基因座中的比率为:1 rap-1a 67,1 rap-1a 61-1和1 rap-1a61-2；7),不同的rap-1基因类型被三类转录间隔区分开；8),rap-1a基因被rap-1b基因间隔开；9),Rap-1c位于基因组的终点.全长基因座大概为31kb,包含6个rap-1a基因,5个rap-1b基因和1个rap-1c基因.上述多基因家族的基因序列及基因座结构的测定为羊巴贝斯虫的深入研究及防控提供一定的理论依据.
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Ovine babesiosis and theileriosis are important hemoprotozoal diseases of sheep and goats in tropical and subtropical regions that lead to economic losses in these animals.PCR: restriction fragment le
为探讨莫氏巴贝斯虫滑动体的结构组成,该研究拟克隆和表达滑动体的部分组件蛋白,并制备多克隆抗体,为研究巴贝斯虫滑动体的结构功能及作用机制奠定基础.因此本研究利用末端快速扩增技术从莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA中扩增gap45、gap50、myo A、actin、aldolase、trap及mic基因,将获得的全长或基因的部分序列构建pGEX:4T:1原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)pLys中用
本研究为了构建莫氏巴贝斯虫(Babesia motasi)裂殖子cDNA表达文库,从中筛选和鉴定功能基因,利用差速离心法从莫氏巴贝斯虫感染的红细胞中纯化裂殖子,提取总RNA并纯化mRNA.在合成的双链cDNA两端加上含EcoRⅠ和HindⅢ定向接头后连接到λSCREEN载体上.通过体外包装形成完整的噬菌体颗粒,并用之转染ER1647,构建莫氏巴贝斯虫裂殖子的cDNA表达文库.用莫氏巴贝斯虫阳性血清
本文利用建立的ELISA方法对采集自我国22个省44个县的3204份血清样品进行低致病力的莫氏巴贝斯虫感染小反刍动物的情况进行调查,结果显示,在被调查的所有省份都有该病的流行,且在各个省份之间血清阳性率有很大差异,如吉林阳性率最低(1.6％),内蒙阳性率最高(91％).其平均阳性率为43.5％(1393/3204),表明低致病性莫氏巴贝斯虫在我国普遍流行.本研究是首次对我国莫氏巴贝斯虫的血清流行状
本研究团队于2010年启动了应用Solexa方法测定羊莫氏巴贝斯虫和羊巴贝斯虫未定种新疆株的全基因组序列测定工作.然而由于数据的不完整性,获得的数据并不能完全组装成出基因组精确图谱.所本研究拟建立这两种巴贝斯虫的BAC文库,为构建其物理图谱和基因组精确图谱做前期的铺垫工作.通过体外培养羊巴贝斯虫未定种新疆株和莫氏巴贝斯虫临潭株单克隆虫株,并感染除脾绵羊,当染虫率达到15％后,收集血液,去除白细胞,
2001年用采自新疆牛羊体的血红扇头蜱和小亚璃眼蜱感染除脾绵羊时,分离获得一株巴贝斯虫,通过对其形态特征、致病性、传播媒介和18S rRNA与ITS基因序列比对分析等研究,初步确定其为一种新发现的羊巴贝斯虫,并将其暂命名为羊巴贝斯虫未定种新疆株.为了对该寄生虫进行深入研究,本研究应用感染的羊血,建立了该寄生虫持续体外培养系统.在24和6孔板中,以RPMI 1640培养液,添加20％的胎牛血清和7.
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本研究应用体外培养单克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株G7株,纯化获得裂殖子,提取/纯化RNA和mRNA,构建裂殖子cDNA表达文库.以感染后第6周的羊血清,用免疫学筛选技术,自该cDNA文库中筛选获得5个具有较高相似性的EST片段(297-357bp).然后应用5RACE扩增技术,扩增获得一个1140bp的基因,同源性分析表明,BQP35与牛巴贝斯虫的一个假定蛋白具有26％的相似性.结果显示,该蛋白是一个
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