【摘 要】
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目的：探讨RNA干扰Nuprl基因对甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导PC12细胞凋亡的影响.方法：分别用浓度0、1.0、2.0、2.5、3、3.5 mmol·L-1的METH处理PC12细胞24 h,实时
【机 构】
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南方医科大学基础医学院法医学系,广州,510515
【出 处】
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第十三届全国药物依赖性学术会议暨国际精神疾病研讨会
论文部分内容阅读
目的：探讨RNA干扰Nuprl基因对甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导PC12细胞凋亡的影响.方法：分别用浓度0、1.0、2.0、2.5、3、3.5 mmol·L-1的METH处理PC12细胞24 h,实时荧光定量PCR和Western Blot分别检测Nupr1基因和蛋白水平的表达变化.针对大鼠Nupr1基因序列,设计3对特异性RNAi靶序列,构建pLVTHM-Nupr1-GFPshRNA慢病毒表达载体在293T细胞包装成病毒颗粒.将3种重组慢病毒及阴性对照病毒感染PC12细胞,检测Nupr1基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率.以干扰效率最佳的细胞为RNAi组,实验分为对照组,RNAi组,对照+METH组,RNAi+METH组,倒置显微镜下观察细胞形态变化；CCK-8法检测细胞存活率；Hoechst染色和TUNEL法检测细胞凋亡率.
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