葡萄MYC转录因子、多磷酸肌醇-5-磷酸酶Ⅰ和乌头酸酶基因的克隆和序列分析

• 作 者: 费菲;刘命华;王萌;程玉琴;范在丰;
• 机 构: 中国农业大学农学与生物技术学院,北京100193
• 出 处: 中国植物病理学会第九届青年学术研讨会
• 发表日期: 2009年期

　　葡萄卷叶相关病毒2号(Grapevine leafroll-associated virus2,GLRaV-2)为长线形病毒科(Closteroviridae)长线形病毒属(Closterovirus)成员,是侵染葡萄作物的一种重要病毒,可导致葡萄卷叶病、嫁接不亲和和幼树速衰甚至死亡等。本文用GLRaV-2基因组编码的植物沉默抑制子p24为诱饵筛选葡萄茎叶cDNA文库,初步获得37个阳性克隆。提取葡萄茎叶总RNA,采用RT-PCR克隆了其中3个阳性克隆,即葡萄MYC转录因子(MYC transcription factor)、多磷酸肌醇-5-磷酸酶Ⅰ(TypeⅠinositol-1,4,5-trisphosphate5-phosphatase)和乌头酸酶(aconitase)基因的完整阅读框序列。实验结果表明,葡萄MYC转录因子基因序列为1992bp,与蓖麻、陆地棉和马铃薯MYC转录因子的核苷酸序列同源性最高,分别为68.69％、64.97％和60.69％。葡萄多磷酸肌醇-5-磷酸酶Ⅰ基因全长为1893bp,与白杨、拟南芥的该基因核苷酸序列同源性分别为72.24％、57.04％。葡萄乌头酸酶基因全长714 bp,与蓖麻、白杨和拟南芥的该基因核苷酸序列同源性分别为57.06％、57.68％和54.39％。
　　磷脂酰肌醇途径在植物的生长、发育和胁迫反应过程中发挥十分重要的作用,而多磷酸肌醇-5-磷酸酶是该途径的关键酶；乌头酸酶则在NO介导的植物抗病信号转导中起着重要作用,而MYC转录因子参与茉莉素介导的植物抗病信号途径。由葡萄卷叶相关病毒侵染导致的葡萄卷叶病在我国发生十分严重,而目前国内外对葡萄卷叶相关病毒致病机制还不清楚。因此通过GL-RaV-2 p24与这些蛋白的互作研究,有助于解析这些蛋白在GLRaV-2侵染过程中的作用,并探讨GLRaV-2侵染的分子机制。