【摘 要】
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目的：前期研究发现SET是三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)致人正常肝细胞(L-02细胞)毒性作用中的关键因子,本研究筛选肝细胞中SET介导的组蛋白异常甲基化修饰,并探讨其在TCE致肝细胞毒性中的可能作用.方法：以正常肝细胞和SET稳定干扰肝细胞为受试细胞,8.0 mmol/L TCE分别处理24h后收集细胞,酸法提取组蛋白并用TCA-丙酮法纯化蛋白,通过TAU-SDS-PAG
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心,广东深圳518055
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目的：前期研究发现SET是三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)致人正常肝细胞(L-02细胞)毒性作用中的关键因子,本研究筛选肝细胞中SET介导的组蛋白异常甲基化修饰,并探讨其在TCE致肝细胞毒性中的可能作用.方法：以正常肝细胞和SET稳定干扰肝细胞为受试细胞,8.0 mmol/L TCE分别处理24h后收集细胞,酸法提取组蛋白并用TCA-丙酮法纯化蛋白,通过TAU-SDS-PAGE分离组蛋白,胶内酶切后利用LC-ESI-MS/MS鉴定和定量分析组蛋白差异甲基化修饰,Western blot验证TCE致肝细胞毒性中SET介导的组蛋白H3K79二甲基化(H3K79 me2)及H3K79三甲基化(H3K79 me3)修饰的异常变化.结果：共鉴定出36个TCE相关的组蛋白异常甲基化修饰位点,其中22个SET介导的组蛋白甲基化修饰.进一步验证了在TCE致肝细胞毒性中SET介导H3K79 me2与H3K79 me3甲基化修饰显著减少.结论： TCE诱导肝细胞组蛋白甲基化修饰异常改变,其中SET介导了H3K79 me2与H3K79 me3水平显著降低,为进一步阐明TCE的肝毒性作用机制提供了新的线索.
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