【摘 要】
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本文介绍一种调控机理不同于其它表达载体、在诸多方法比其它载体优越,并且具有自主知识产权的新型表达载体pHsh以及它的衍生载体pHsh-duo.pHsh结构特征是:具有一个人工合成
【机 构】
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江苏南京师范大学生命科学学院(南京)
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本文介绍一种调控机理不同于其它表达载体、在诸多方法比其它载体优越,并且具有自主知识产权的新型表达载体pHsh以及它的衍生载体pHsh-duo.pHsh结构特征是:具有一个人工合成的由大肠杆菌<32>识别和调控的启动子,以及一个不依赖于大肠杆菌Rho的GAAA终止子;其诱导表达特征是:通过热激诱导外源基因的表达,但受热激诱导的宿主蛋白酶活性很低,表达水平远远高于P<,L>载体,而且目标蛋白的群体表达量(mg/L)一般高于T7载体;除此以外,pHsh-duo的多克隆位点还有以下特征;共有3个SD序列便于多拷贝或多基因同时表达,每个被克隆基因拷贝的上游不需设置酶切位点,每个SD序列与起始密码子之间的碱基数最有利于高效表达.同时,本文还介绍一套使大体积发酵液得到快速升温的技术.
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