肠道病毒71型抗原含量检测方法的建立及初步验证

• 作 者: 徐静 崔文禹 李树香 刘敬 王欣怡 陈蕾 沈心亮
• 机 构: 100024,北生物制品研究所,100024,北生物制品研究所,100024,北生物制品研究所,100024,北生物制品研究所,100024,北生物制品研究所,100024,北生物制品研究所,1000
• 出 处: 中华实验和临床病毒学杂志
• 发表日期: 2009年23期

目的 建立肠道病毒71型(EV71)抗原含量检测方法并进行初步验证,用于疫苗研制及生产过程中抗原含量的检测.方法 以抗EV71单克隆抗体为包被抗体,酶标抗EV71多克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法,以本室自制EV71抗原参考品为定量标准,建立抗原标准曲线,确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行初步验证.结果 建立了双抗体夹心检测EV71抗原含量的ELISA方法,定量限度为0.23μg/ml,最佳定量范围为7.32～0.23μg/ml,相关系数为R2=0.9976;准确性较好,回收率在90%～110%之间;精密性较好,变异系数小于10%;除与EV71样品有特异性反应外,与其他样品无交叉反应.结论 建立了检测EV71抗原含量的双抗体夹心ELISA方法并进行了初步验证,为疫苗研制过程中抗原含量测定提供了简便、快捷的检测手段。