【摘 要】
：
目的:用体外研究方法,通过检测Caspase-9活性及细胞凋亡,探讨Caspase-9在有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡中的作用。方法:用0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L的TCE处NHEK 4h,并培养4、8、12、24 h,分光光度法检测上清中Caspase-9活性,Anncxin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;Ca
【机 构】
：
安徽医科大学公共卫生学院卫生毒理系 安徽医科大学皮肤病研究所 安徽医科大学公卫学院劳动卫生与环境卫
【出 处】
：
中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议
论文部分内容阅读
目的:用体外研究方法,通过检测Caspase-9活性及细胞凋亡,探讨Caspase-9在有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡中的作用。
方法:用0.125、0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L的TCE处NHEK 4h,并培养4、8、12、24 h,分光光度法检测上清中Caspase-9活性,Anncxin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用Z-LEHD-FMK预处理NHEK 1 h,然后用2.0 mmol/L TCE染毒4h后培养至12 h。
结果:不同浓度TCE处理NHEK 4h后培养不同时间,可诱导caspase-9活性呈现剂量-和时间-效应的升高,培养12和24h时,各TCE处理组caspase-9活性与溶剂对照相比差异均有统计学意义(p<0.05)。不同浓度TCE处理NHEK4h后培养12h,凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随着TCE剂量增加而升高,除0.125 mmol/L TCE组外,其它各处理组Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05)。相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-9活性呈正相关(p<0.05)。100μmol/LZ-LEHD-FMK预处理明显抑制2.0mmol/LTCE诱导的caspase-9活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(p<0.01)。
结论:内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9在TCE诱导的NHEK凋亡中被激活。
其他文献
目的:研究疑难复杂性晚期肝癌(ocult advancedhepatocarcinoma)多学科综合介入治疗的不同策略及其临床疗效。方法:选择不能手术切除的巨块型(直径≥5cm)、多发结节型和复发转移性晚期肝癌病例,经术前常规、影像、肿瘤标志物或病理活检明确诊断,无介入手术禁忌症,根据患者病情和要求,分别采取综合序贯介入、单项介入和姑息保守三种治疗策略。对血供丰富的巨块型肝癌和多发结节/复发转移性
目的:探讨经肛门内镜显微手术(transanal endoscopicmicrosurgery,TEM)治疗直肠肿瘤的疗效。方法:2009年1月一2010年12月,我院行TEM治疗老年直肠肿瘤患者7例。全麻下根据肿瘤位置选择合适的体位。经肛门插入特殊的TEM直肠镜,保持CO2充气状态,在立体视镜和腔镜系统下,采用针形电刀将直肠肿瘤完整切除(黏膜下或全层切除),直肠创面行连续缝合。结果:7例直肠肿瘤
目的:探讨腹腔镜贲门周围血管离断术治疗门静脉高压症的安全性及有效性。方法:回顾分析5例腹腔镜贲门周围血管离断术的临床资料。结果:无中转开腹,手术均在腹腔镜下完成,手术时间为210min一320min,术中出血量200—1200ml,无并发症发生。结论:腹腔镜贲门周围血管离断术安全可行,且具有微创的特点。
目的:探讨腹腔镜探查在腹部闭合性损伤中的临床应用价值。方法:回顾性分析我院2006年1月致2009年12月行腹腔镜探查的90例腹部闭合性损伤患者的临床资料。结果:所有伤者经腹腔镜探查均能明确诊断,确诊率100％,诊治一体化占80％(72/90),中转开腹手术率20％(18/90)。其中23例(25.56％,23/90)可以认为是非治疗性的,仅作诊断。本组伤者均痊愈出院。无手术并发症和死亡发生;住院
随着研究的深入，体细胞突变学说受到越来越多的质疑，例如化学致癌物的致癌作用与致突变作用相符性不一致、肿瘤发生的表遗传学机制、细胞间通讯发生机制、癌干细胞学说、染色体不稳定学说，免疫系统促癌学说及细胞克隆机制、癌症的自然消退、癌细胞核转移实验、终末分化细胞不会获得细胞分裂的能力等研究结果，无法用体细胞突变学说进行解释，肿瘤发生机制的认识面临着新的挑战。本文仅就染色体不稳定学说，免疫系统促癌学说进行介
目的:通过DEHP影响EL4淋巴细胞分泌IL-2蛋白的机制研究,初步探讨DEHP对Th1型细胞因子的影响。方法:不同浓度DEHP染毒以25ng/mLPMA+1μg/mlIon激活的EL4细胞,并用钙调神经磷酸酶抑制剂FK506进行干预。实验6h用RT-PCR方法检测NFAT(NFAT1及NFAT2)的mRNA表达;实验48h用ELISA方法检测IL-2蛋白表达。结果: 50μmol/LDEHP能明
本文研究探讨转染wt-p53基因的树突状细胞(DC)体外诱导特异性的抗淋巴瘤的细胞毒性效应(CTL)。对来源于弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的肿大淋巴结进行DC的诱导培养,用rAd-p53转染DC,用Western-blot鉴定p53的表达,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL),用混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,以ELISA法检测上清
目的:研究邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)对原代淋巴细胞分泌Th1、Th2型细胞因子的作用,进而探讨其对Th1/Th2平衡的影响。方法:分别用刀豆蛋白(ConA)及佛波酯+离子霉素(PMA+Ion)去激活脾淋巴细胞,以不同浓度DEHP染毒细胞72h及96h,实验终点检测细胞增殖、细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力及Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、I
目的:通过动物实验,从分子水平研究Cu/Zn-SOD蛋白表达与氟中毒的关系。方法:32只三周龄SD大鼠,雌雄各半,按体重随机分为四个组。对照组每天给予去离子水灌胃,氟暴露组每天给予氟化钠10mg/Kg、20mg/kg、40mg/kg灌胃。染毒3个月后留取24小时尿液,处死。测定血氟、尿氟含量,大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,采用免疫组化法检测脑组织SOD表达(IOD值
目的:用松胞素-B微核分析法对上海“6.25”钴源事故3名受照者照后17年进行随访,为评价辐射对人体的远后效应及其临床意义提供依据。方法:照后17年抽取静脉血,以松胞素-B微核分析法观察微核(MN)率及其微核细胞(MNC)率。结果:照后17年,MN、MNC率仍高于正常参考值;MNC中的MN出现频率仍与早先受照剂量相关,含2个以上MN的MNC数以受照剂量最大的“龙”最高,“俊”次之,而受照剂量最低的