【摘 要】
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[目的]研究多氯联苯醌类代谢产物暴露下HepG2细胞和小鼠的应激反应.[材料和方法]HepG2细胞接种于含10％小牛血清,100 U/ml青霉素和100 U/mL链霉素的DMEM培养液,置于含5％C02
【机 构】
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重庆市北碚区西南大学药学院,重庆,400715
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]研究多氯联苯醌类代谢产物暴露下HepG2细胞和小鼠的应激反应.[材料和方法]HepG2细胞接种于含10％小牛血清,100 U/ml青霉素和100 U/mL链霉素的DMEM培养液,置于含5％C02、37℃的培养箱中培养细胞.弃去原培养液,用PBS轻轻洗细胞3次,加入0.25％胰酶消化液,镜下观察细胞变为圆亮点后,加入少量培养液终止反应,用移液器反复吹打细胞使其完全脱落.转入5ml离心管中,以1000rpm离心5min,弃上清,加入培养基,用移液器反复吹打成单细胞悬液.将细胞悬液按一定比例转移至新的培养瓶中培养.小鼠随机分成四组,每组8只.在相对湿度50％,温度25±2℃,循环光照12 h,黑暗12 h的标准饲养条件下,饲养5天后, 染毒.剂量为1 mg/kg.[结果]多氯联苯醌导致了肝损伤,组织病理性改变,有大面积的肝小叶坏死,中央静脉变形,大量炎症细胞浸润.细胞实验证明在多氯联苯醌引起的氧化损伤后会激活系列的应激反应,包括细胞周期阻滞、未折叠蛋白反应和DNA损伤修复.通过激活PERK/eIF2α/ATF4/CHOP、Caspase12/Caspase 9/Caspase 3信号通路诱导HepG2细胞凋亡.PCB29-pQ引起的内质网应激受细胞内钙离子和ROS水平的调节.通过这些应激反应降低多氯联苯醌对细胞的损伤而促进其存活.但是,当损伤严重到不能修复的时候,细胞会转移"促存活信号"到"促凋亡/死亡信号",以维持细胞遗传信息等的完整性.[结论]发现并确认多氯联苯醌类代谢产物暴露引起氧化损伤有关信号分子和信号通路调控,为应激状态或病理情况下细胞性状和功能改变等提供了新认识.
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