【摘 要】
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目的 制备一种表面带正电荷的阳离子微泡,并与SonoVue对比研究对基因的携载能力,以期寻找一种更有效的基因载体.方法 ①制备阳离子微泡：以冷冻干燥结合机械振荡法制备目的微泡.②检测阳离子微泡的有关物理特性：测量微泡的大小和浓度,以马尔文Zeta电位仪测量阳离子微泡和SonoVue的Zeta电位.③检测阳离子微泡和SonoVue体外携载基因能力：将阳离子微泡和SonoVue分别与PI染色的质粒DN
【机 构】
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第三军医大学新桥医院超声诊断科,重庆,400037
【出 处】
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1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging
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目的 制备一种表面带正电荷的阳离子微泡,并与SonoVue对比研究对基因的携载能力,以期寻找一种更有效的基因载体.方法 ①制备阳离子微泡：以冷冻干燥结合机械振荡法制备目的微泡.②检测阳离子微泡的有关物理特性：测量微泡的大小和浓度,以马尔文Zeta电位仪测量阳离子微泡和SonoVue的Zeta电位.③检测阳离子微泡和SonoVue体外携载基因能力：将阳离子微泡和SonoVue分别与PI染色的质粒DNA在室温下共同孵育后置于激光共聚焦显微镜下观察二者的形态和连接情况；将阳离子微泡和SonoVue分别与质粒DNA按不同比例孵育后置于电泳仪中观察各泳道的电泳情况.结果 ①阳离子微泡形态规则,粒径较均匀,大小在3.7～6.8μm,浓度6.5×108/L.②阳离子微泡表面Zeta电位(50.6±3.6) mV,SonoVue表面Zeta电位为(-40.5±2.8)mV,二者差异显著.③激光共聚焦显微镜下,被PI染成红色的质粒DNA吸附在阳离子微泡的表面,呈"花环"状聚集,而与SonoVue共孵育的质粒在镜下呈杂乱分布.④电泳结果显示,当阳离子微泡与质粒DNA体积比≥2∶1时,质粒可完全滞留在加样孔内,微泡阻滞效果明显；反之,则只有部分质粒滞留在加样孔内,且微泡的这种阻滞能力随着二者体积比例的减小而降低.而SonoVue无论以何种比例与质粒孵育,加样孔内均未见明显的质粒滞留,相应泳道上则可见明显的DNA条带显示,其阻滞效果不明显.结论 自制阳离子微泡的基因携载能力明显高于SonoVue,有望成为一种新的基因载体.
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