【摘 要】
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目的：本研究以HER2阳性的乳腺癌干细胞为研究对象，研究mTOR靶向治疗药物依维莫司与HFR2靶向治疗药物赫塞汀之间存在潜在的联合作用，以了解这两种药物对乳腺癌干细胞的作用。
【机 构】
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天津医科大学附属肿瘤医院天津乳腺癌防治研究中心乳腺三科 教育部乳腺癌防治重点实验室 天津市肿瘤防治重点实验室
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目的：本研究以HER2阳性的乳腺癌干细胞为研究对象，研究mTOR靶向治疗药物依维莫司与HFR2靶向治疗药物赫塞汀之间存在潜在的联合作用，以了解这两种药物对乳腺癌干细胞的作用。方法：在体外实验，我们以HER2原代乳腺癌细胞及BT474乳腺癌细胞系为研究对象，利用流式细胞仪进行分选ESA+CD44+CD24-/low表达的乳腺癌细胞为乳腺癌干细胞，利用MTT方法研究依维莫司单一用药与依维莫司联合曲妥珠单抗对HER2阳性乳腺癌干细胞的生长抑制作用。利用流式细胞仪，分析单一用药及联合用药对乳腺癌干细胞细胞周期及凋亡的影响，采用软克隆琼脂实验了解药物对乳腺癌干细胞成瘤性的影响。在体外实验中，本研究将从BT474细胞系中分选出的乳腺癌干细胞植入BALB/c裸鼠体内，并给予治疗，对肿物大小及动物体重进行检测，并KI-67，CD31，AKT1及pAKT(Thr308)指标进行免疫组化检测。结果：在体外试验中，针对非干细胞，常规剂量的曲妥珠单抗治疗不能有效的抑制乳腺癌干细胞的生长。依维莫司单独用药实验发现其根据浓度的增加，其作用的强度不断加大。在药物联合作用研究中，相较于单一用药组，依维莫司联合曲妥珠单抗对细胞生长抑制作用有显著增加(P<0.001)且体外成瘤能力也显著下降(P<0.001)。相对于单一用药组，联合用药可诱导Gl期阻滞增加。在体内研究中，依维莫司联合曲妥珠单抗可显著缩小HER2阳性肿瘤范围(P=0.007)，且显著下调K167、pAKT及AKTl蛋白表达(P<0.05)。结论：本实验中的体内、体外研究表明，依维莫司与曲妥珠单抗联合用药可一定程度上增强各自对HER2阳性乳腺癌干细胞的抑制作用，为乳腺癌患者提供新的治疗选择，其联合作用效果仍需要大规模的临床试验进一步验证。
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