【摘 要】
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目的 探讨水通道蛋白5 (aquaporin-5,AQP5)在海水浸泡导致的细胞损伤中的变化,同时了解丹参酮ⅡA可能的作用机制.方法 体外传代培养肺腺癌细胞株(A549细胞),接种于培养皿中,按不同海水浓度分为空白对照组及15％、25％、50％、75％、100％海水组；按海水浓度为25％时以不同浸泡时间分为空白对照组及海水浸泡1、4、8h组；按不同丹参酮ⅡA浓度分为空白对照组、海水组及25、50、
【机 构】
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第四军医大学唐都医院呼吸内科 陕西西安710038 第四军医大学基础部病理和病理生理教研室 710
【出 处】
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第11届全军呼吸内科专业委员会年会
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目的 探讨水通道蛋白5 (aquaporin-5,AQP5)在海水浸泡导致的细胞损伤中的变化,同时了解丹参酮ⅡA可能的作用机制.方法 体外传代培养肺腺癌细胞株(A549细胞),接种于培养皿中,按不同海水浓度分为空白对照组及15％、25％、50％、75％、100％海水组；按海水浓度为25％时以不同浸泡时间分为空白对照组及海水浸泡1、4、8h组；按不同丹参酮ⅡA浓度分为空白对照组、海水组及25、50、75、100 ug/ml丹参酮ⅡA组.用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测各组AQP5蛋白表达；用免疫组化法检测AQP5的阳性表达.结果 倒置显微镜下观察可见各海水浓度组A549细胞均出现不同程度的形态变圆,胞体变暗,以及脱壁死亡,而25 ug/ml丹参酮ⅡA组细胞形态和亮度接近正常组.Western blotting结果显示,25％(1.053±0.231)与50％海水组(1.116±0.316)AQP5蛋白表达均较空白对照组(0.101±0.081)明显增高,(均P＜0.05)；海水浸泡1h组AQP5表达(0.306±0.125)增加不明显,4h组(1.423±0.377)较空白对照组(0.288±0.098)明显增加(P＜o.01),8h组AQP表达(1.507±0.461)较4h组略有增加,但差异无统计学意义；海水浸泡4h时25 ug/ml(0.580±0.186)与50 ug/ml(0.499±0.172)丹参酮ⅡA组AQP5蛋白表达较海水组(1.013±0.287)均明显减少(P＜0.05).免疫组化显示,海水组AQP5蛋白表达(7.21±0.775)较空白对照组(0.41±0.068)增多(P＜0.01),而丹参酮ⅡA干预组AQP5(3.02±0.23)较海水组明显减少(P＜0.05).结论 本实验表明丹参酮ⅡA在25 ug/ml浓度时毒副作用最小,而对海水浸泡的A549细胞正常形态及活性的保护作用最佳,为最合适剂量.在此剂量下丹参酮ⅡA对海水浸泡的A549细胞的保护作用的机制可能是通过抑制AQP5的过度表达.
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