猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)转录调控序列(TRS)鉴定及其功能解析

• 作 者: 郑海红[1]孙志[2]王金勇[2]朱兴全[3]袁世山[2]
• 机 构: 中国农业科学院上海兽医研究所 动物传染病研究室 农业部动物寄生虫病重点实验室 上海 200232 华南农业大学兽医学院 广东 广州 510642
• 出 处: 2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
• 发表日期: 2007年期

利用RT-PCR技术确定了PRRSV北美株各TRS-B位置及各sgmRNA Leader-Body junction序列。继而以PRRSV北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作，以点突变PCR对所确定的形成sgmRNA7的TRS-B进行突变，构建一系列全长突变体，解析TRS-B突变对病毒感染性及亚基因组转录的影响。结果发现：TRS-B 3’碱基的突变使sgmRNA7转录减弱，且一起突变RNA7.1的TRS-B 3’最末端两个碱基的全长突变体失去了对细胞的感染性。证明了TRS-B 3’最末端两个碱基对sgmRNA7转录至关重要，且RNK7.1的TRS-B对病毒的感染性是必需的。