【摘 要】
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目的：构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FAPα(野生型FAPα)、pcDNA3.1(+)-tFAPα(胞外段FAPα)和pcDNA3.1(+)-mFAPα(缺失624到704位氨基酸).方法：①根据Genebank中人FA
【机 构】
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510515广州,南方医科大学南方医院·南方医科大学口腔医学院
【出 处】
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中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十次全国老年口腔医学学术年会
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目的：构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FAPα(野生型FAPα)、pcDNA3.1(+)-tFAPα(胞外段FAPα)和pcDNA3.1(+)-mFAPα(缺失624到704位氨基酸).方法：①根据Genebank中人FAPα的cDNA序列及UniProt中(http：//www.uniprot.org/uniprot/Q 12884)提供的人FAPα蛋白结构,设计并合成野生型FAPα引物和胞外段FAPα引物,提取口腔癌组织总RNA,RT-PCR,获得FAPα、tFAPα扩增产物,分别连接至pcDNA3.1(+).②以pcDNA3.1(+)-FAPα为模板,采用overlap PCR技术,获得624到704位氨基酸缺失片段mFAPα,连接至pcDNA3.1(+).结果：双酶切鉴定并测序验证pcDNA3.1(+)-FAPα、pcDNA3.1(+)-tFAPα和pcDNA3.1(+)-mFAPα构建成功.结论：pcDNA3.1(+)-FAPα、pcDNA3.1(+)-tFAPα和pcDNA3.1(+)-mFAPα成功构建,为进一步研究FAPα在口腔鳞癌发病过程中的分子机理奠定基础,探讨以FAP为靶点的口腔鳞癌靶向治疗提供了条件.
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