PMT4对新生隐球菌生物膜药物敏感性的影响

• 作 者: 徐瑞宏 方伟 廖万清
• 机 构: 第二军医大学附属长征医院皮肤科，上海200003
• 出 处: 第五届中美临床微生物年会暨艾滋病机会感染研讨会
• 发表日期: 2009年6期
• 关键词: 新生隐球菌 PMT4缺陷株 生物膜 抗真菌药物 药物敏感性

目的:观察新生隐球菌H99野生株和PMT4缺陷株所形成的生物膜在抗真菌药物敏感性方面的差异。
方法:采用PCR介导的长侧翼同源重组的方法敲除新生隐球菌H99的PMT4基因：采用基础培养基96孔板培养的方法建立生物膜体外模型；兔中心静脉插管、管内放置聚苯乙烯薄膜的方法建立生物膜动物模型；用M27A2药敏方案和MTT方法检测生物膜的药物敏感性。
结果:M27A2方案结果：FCZ、AmB、5-FC、ITR对H99野生株及其PMT4缺陷株游离细胞的MIC值(μg/ml)分别是4、1、4、≤0.125和1、0.25、0.5、≤0.125；对生物膜细胞的MIC值(μg/ml)分别是4、2、8、≤0.125和2、0.125、4、≤0.125。MTT检测发现，这四种药物使浊度下降80％所需的最低药物浓度(μg/ml)在H99野生株生物膜和PMT4缺陷株生物膜中分别是≥64、32、≥64、16和2、0.5、4、1。动物模型中，在64μg/mlFCZ作用下，PMT4缺陷株生物膜细胞的代谢活性抑制率为96.7％，H99野生株生物膜细胞为8.7％。
结论:MTT方法可用于生物膜的药物敏感性研究，而M27A2方案不适用于生物膜细胞的药敏试验；PMT4基因对新生隐球菌生物膜的药物抵抗至关重要，PMT4及其产物可能成为新的药物靶点。