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本文以N-甲基-N-三甲基硅基三氟乙酰胺（MSTFA）为衍生化试剂，采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS）系统研究了4种类固醇类内分泌干扰物雌酮（E1）、17β-雌二醇（E2）、雌三醇（E3）、17α-乙炔基雌二醇（EE2）的羟基衍生化，主要考察了MSTFA用量、衍生化温度、衍生化时间对类固醇类内分泌干扰物衍生化效果的影响以及衍生化产物的稳定性、标准曲线、仪器检出限等。结果表明：对于100μL浓度为0.01μg/μL的标准混合溶液，MSTFA的最佳用量为20μL；最佳衍生化条件为70℃下反应30min；衍生化产物的稳定性较好，在-20℃下放置48h，RRF基本没有降低；在优化的实验条件下，各待测物具有良好的线性相关性，E1和E2的仪器检出限为0.1 pg/μL，EE2、E3的仪器检出限为1pg/μL。