【摘 要】
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[目的]电光叶蝉以持久增殖型方式进行传播水稻瘤矮病的病原——水稻瘤矮病毒(RGDV).针对RGDV在介体电光叶蝉中是否能经卵传播,以及病毒在电光叶蝉卵巢内的侵染过程研究.[方法]本研究通过qRT-PCR、免疫荧光标记、透射电子显微镜、RNA干扰技术对RGDV经卵传播的机制进行了初步的研究.[结果]免疫荧光标记与电镜结果表明RGDV首先聚集在电光叶蝉雌虫卵巢管端丝,由生殖区侵入并大量增值,并随卵巢的
【机 构】
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福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室,福州,福建,350002
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[目的]电光叶蝉以持久增殖型方式进行传播水稻瘤矮病的病原——水稻瘤矮病毒(RGDV).针对RGDV在介体电光叶蝉中是否能经卵传播,以及病毒在电光叶蝉卵巢内的侵染过程研究.[方法]本研究通过qRT-PCR、免疫荧光标记、透射电子显微镜、RNA干扰技术对RGDV经卵传播的机制进行了初步的研究.[结果]免疫荧光标记与电镜结果表明RGDV首先聚集在电光叶蝉雌虫卵巢管端丝,由生殖区侵入并大量增值,并随卵巢的发育逐渐侵染整个卵巢.在这一过程中,RGDV利用病毒编码的非结构蛋白Pns 11形成的管状结构运输病毒粒体穿过滤泡细胞及微绒毛区进入卵黄区,最终经卵传播给后代.此外,通过体外合成RGDV的S11基因双链RNA,通过显微注射带毒若虫干扰RGDV编码的非结构蛋白Pns11的形成,羽化后进行单雌单雄交配实验.产卵十天,挑取统计每天的产卵量并提取单个卵的总RNA,应用qRT-PCR技术检测卵的带毒率.结果 显示,显微注射dsPns 11干扰带毒雌虫与健康雄虫进行交配子代的带毒率仅为5.5％,显著低于带毒雌虫与健康雄虫及注射dsGFP的带毒雌虫与健康雄虫交配子代带毒率(21.3％).双链RNA干扰技术进一步验证了Pns11是RGDV突破电光叶蝉经卵传播屏障的运输工具.[结论]RGDV能在电光叶蝉中经卵传播,并借助Pns 11穿过电光叶蝉卵巢微绒毛结构入卵.研究结果为进一步阐明病毒在介体昆虫经卵传播的机制提供了依据,也为开拓新的病害防治途径奠定了基础.
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