【摘 要】
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目的:构建葡萄糖醛酸化的功能模块,即在大肠杆菌体内构建活性糖醛酸供体UDPGA所需的三种功能蛋白和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(GAT)的功能蛋白,以实现活细胞催化的黄酮的糖基化修饰.方法:优化大肠杆菌体内自身合成尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)的代谢途径,将从植物黄芩中克隆得到的糖基转移酶基因(SbGAT-W76)转入到上述重组菌,得到4种功能模块不同组合下的九种工程菌.结果:确定了4种功能模块
【机 构】
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中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,卫生部天然药物生物合成重点实验室,北京 100050
【出 处】
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第十二届全国青年药学工作者最新科研成果交流会
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目的:构建葡萄糖醛酸化的功能模块,即在大肠杆菌体内构建活性糖醛酸供体UDPGA所需的三种功能蛋白和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(GAT)的功能蛋白,以实现活细胞催化的黄酮的糖基化修饰.
方法:优化大肠杆菌体内自身合成尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)的代谢途径,将从植物黄芩中克隆得到的糖基转移酶基因(SbGAT-W76)转入到上述重组菌,得到4种功能模块不同组合下的九种工程菌.
结果:确定了4种功能模块都存在的工程菌株催化多种黄酮类化合物的糖基化修饰,定向催化黄酮7位的葡萄糖醛酸化.确定了催化体系为M9培养基(含2％葡萄糖),最佳体系为4种模块都存在的体系.
结论:本实验构建了黄酮糖醛酸化反应的4种功能模块,实现了活细胞催化黄酮的糖基化修饰,为此类工程菌的应用提供了基础.
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