Notch1基因沉默抑制骨髓源性脂肪祖细胞向成熟脂肪细胞分化

来源 :第十二届中国实验动物科学年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tting0226
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  目的 探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞(BMAPCs)向脂肪细胞分化的影响.方法 无菌取SD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养,流式分析检测细胞表面标志表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-timeqPCR)检测脂肪相关基因和Notch信号分子表达.实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组.Western blotting检测干扰效率;STEMPRO(R) Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂诱导.结果 BMAPCs表达CD34、CD44、CD45及CD90,且表达6种脂肪相关基因及Notch信号分子;成脂诱导促进Notch1 mRNA表达(P<0.01);Notch1小RNA干扰抑制Notch1蛋白表达(P<0.05).Notch siRNA组Cebpa、Lpl和Ppaγ(分别为P<0.05)、S1c2a4与Fabp4(分别为P<0.01) mRNA表达均较对照显著降低,而pread1 mRNA表达显著增加(P<0.05);Notch小RNA干扰显著抑制脂肪细胞百分率(P<0.05).结论 Notch1基因沉默抑制BMAPCs向成熟脂肪细胞分化.
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