【摘 要】
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目的 探讨胞磷胆碱是否通过改善血脑屏障(BBB)功能来发挥其临床疗效,并进一步研究其是否是通过影响紧密连接蛋白(TJPs)来作用于BBB；方法 运用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及小
【机 构】
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广东省湛江市霞山区人民大道南57号 广东医学院附属医院神经内科 524000
【出 处】
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广东省医学会第十五次神经病学学术会议暨第五届粤港澳神经病学学术会议
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目的 探讨胞磷胆碱是否通过改善血脑屏障(BBB)功能来发挥其临床疗效,并进一步研究其是否是通过影响紧密连接蛋白(TJPs)来作用于BBB；方法 运用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)两个细胞系通过24小时缺氧及6小时缺氧无糖处理来建立体外BBB破坏模型.据是否予以胞磷胆碱治疗分为模型组及胞磷胆碱组(0.1 mmol/L,1.0mmol/L),以FITC-Dextran荧光染料渗透实验检测BBB功能,Real time PCR,Western blot检测紧密连接蛋白ZO-1,Occludin,Claudin-1,5表达水平的变化,免疫荧光检测以上TJPs的分布和表达情况；结果 1、与对照组相比,HUVEC及bEnd.3经过缺氧或缺氧无糖作用后,荧光渗透值均显著增加,提示成功建立BBB破坏模型.2、HUVEC模型组ZO-1及Occludin的表达水平明显减少,ZO-1分布发生改变,大部分从胞膜转移入胞浆；bEnd.3模型组ZO-1及Claudin-5的表达水平明显减少,而Claudin-1增加,未见有定位改变.表明BBB功能受损后TJPs发生表达水平或定位上的改变.3、HUVEC模型组及bEnd.3模型组予低浓度及高浓度的胞磷胆碱作用后,荧光渗透值均明显降低(P＜0.01),表明胞磷胆碱可以改善受损BBB的功能.4、HUVEC胞磷胆碱组的ZO-1及Occludin的表达水平增加(P＜0.01),ZO-1大部分恢复膜定位；bEnd.3胞磷胆碱组的ZO-1,Claudin-1,5表达水平增加(P＜0.01).提示胞磷胆碱可以恢复受损BBB中特定TJPs的表达或定位.结论 胞磷胆碱可能是通过上调紧密连接蛋白如ZO-1,Occludin,Claudin-1,5的表达水平或恢复其定位,来改善BBB功能,从而发挥临床疗效.
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