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目的:1)初步探讨青风藤中提取的生物碱单体青藤碱(Sinomenine,SN)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞表达与分泌TNF-α、IL-1β、IL-10的影响,从NF-кB信号通路中相关环节来探讨其具体的作用机制及可能的量效关系.2)探讨SN在改善小鼠胶原性关节炎(CIA)关节症状、抑制体液免疫和细胞免疫方面与甲氨喋呤(MTX)的异同以及与MTX是否有叠加效应.3)探讨SN对类风湿关节炎(RA)患者血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10及抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)的影响.方法:1)建立AA大鼠模型,获取腹腔巨噬细胞,从膝关节取滑膜组织并稳定培养滑膜细胞,提取细胞核蛋白及胞浆蛋白,RT-PCR检测TNF-α mRNA、IL-1β mRNA及IL-10mRNA的表达,电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测核转录因子NF-кB及AP-1的活性,Wertern blotting检测胞浆IкB-α的表达,激光共聚焦检测P65抗体的核转位情况.2)以CIA小鼠为研究对象,观察不同剂量SN和SN+MTX治疗后小鼠关节炎症的变化,ELISA法测定各组小鼠脾细胞分泌IFN-γ的水平和小鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体的水平.3)以健康成人为正常对照组,ELISA检测活动性RA患者予SN或MTX治疗前及治疗1月、2月时血清中TNF-α、IL-1β、IL-10的含量及抗CCP抗体的滴度.结果:1)SN下调巨噬细胞及滑膜细胞内TNF-α mRNA、IL-1β mRNA及IL-10mRNA的表达,抑制NF-кB活性及IкB-α的降解,同时,SN可抑制P65的核转位,有一定的量效关系及相关性.2)与正常对照组相比,RA患者血清中TNF-α、IL-1β含量明显增加(P＜0.01),IL-10的含量无明显变化.SN及MTX能显著降低RA患者血清中IL-1β、TNF-α的含量(P＜0.01),而对IL 10的含量及抗CCP抗体的滴度无明显作用(P＞0.05). 3)大剂量或小剂量应用SN治疗CIA,其改善炎症症状、抑制IFN-γ和抗Ⅱ型胶原抗体的能力均不及经典抗风湿药物-MTX.但SN与MTX联合治疗CIA,优于其他治疗方案.结论:SN可通过降低RA患者中血清TNF-α、IL-1β的含量而治疗RA.其机制之一在于SN可通过抑制NF-кB活性及IкB-α的降解而下调腹腔巨噬细胞及滑膜细胞内TNF-αmRNA、IL-1β mRNA的表达.大剂量或小剂量应用SN治疗CIA,其改善炎症症状、抑制IFN-γ和抗Ⅱ型胶原抗体的能力均不及经典抗风湿药物-MTX,但SN与MTX联合治疗CIA,优于其他治疗方案.因此,SN具有一定的免疫抑制效应,作为慢作用抗风湿药的辅助药物更为妥当.