【摘 要】
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目的建立疫苗评价用豚鼠免疫毒理学评价方法,并应用建立的评价指标对结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性进行初步评价.方法制备豚鼠过敏模型30只,阴性对照15 只.建立豚鼠
【出 处】
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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周
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目的建立疫苗评价用豚鼠免疫毒理学评价方法,并应用建立的评价指标对结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性进行初步评价.方法制备豚鼠过敏模型30只,阴性对照15 只.建立豚鼠血清总IgG1 抗体检测和外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清、支气管肺泡灌洗液上清,以及腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中的过敏性介质(组胺和白三烯)含量的检测方法.将豚鼠分成3 组,分别为过敏模型组、耻垢疫苗组和阴性对照组,每组6只,应用已建立的以上几种评价指标初步进行了结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性评价.结果以6μg/ml 羊抗豚鼠IgG1 抗体包被,待测血清稀释1：105,以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗豚鼠IgG1 抗体稀释1：20 000 的实验条件为豚鼠血清总IgG1 抗体的最佳检测方法.外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清中,豚鼠过敏模型组和对照组中组胺含量分别为(99.37±15.34)nmol/L (29.94±5.86)nmol/L； 白三烯含量分别为(13.09±3.87)pg/ml 和(2.22±0.53)pg/ml.支气管肺泡灌洗液上清组胺含量分别为(73.42±18.60)nmol/L 和(31.00±12.09)nmol/L,白三烯含量分别为(123.20±16.57)pg/ml 和(39.05±16.94)pg/ml.腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中组胺含量分别为(39.59±12.94)nmol/L 和(14.35±5.85)nmol/L,白三烯含量分别为(6.79±2.58)pg/ml 和(3.09±1.18)pg/ml.以上3 种不同组织来源的样本中,过敏模型组的组胺和白三烯含量与对照组相比差异均有统计学意义(组胺：t=12.60,t=5.41,t=5.20,P＜0.05；白三烯：t=8.46,t=9.15,t=3.85,P＜0.05).应用以上方法评价结核病新疫苗未见免疫学毒理学异常反应.结论实验初步建立了免疫毒理学评价方法,以该方法评价耻垢疫苗未见免疫毒理学异常反应.
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