【摘 要】
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目的:采用组织块法体外培养成年兔肌腱细胞，观察其细胞形态、生长增殖情况以及Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白的表达。方法:无菌条件下取成年新西兰白兔双侧后肢趾屈肌腱，手术显微镜下剥离
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院手外科 130033
【出 处】
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中华医学会手外科分会全国周围神经学术会议暨东北地区第三届手外科学术会议
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目的:采用组织块法体外培养成年兔肌腱细胞，观察其细胞形态、生长增殖情况以及Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白的表达。方法:无菌条件下取成年新西兰白兔双侧后肢趾屈肌腱，手术显微镜下剥离、去除肌腱外膜组织，剪成组织小块，0.25％胰蛋白酶和0.1%胶原酶I消化10-15min，离心去上清，将组织小块转移到培养瓶中，贴壁后加入1mL培养液，待细胞游出贴壁生长时，再加培养液继续培养，每3d换液1次，当细胞长到80%-90%融合时按1:3传代。结果与结论:一般lOd左右细胞会从组织块游出贴壁生长，此时细胞多呈星形或不规则形，随着时间延长细胞逐渐增多，呈梭形的成纤维细胞样。传代细胞刚接种时圆形，4-6h开始贴壁并伸展为梭形，排列逐渐规则成群。从传代细胞的生长曲线可看出，前4d细胞生长较慢，为潜伏期，第5天后进人快速增殖期，7d以后进入平台期。免疫荧光法证实Ⅰ型胶原染色阳性，而Ⅱ型胶原染色呈阴性。结果表明采用组织块法可在体外成功培养成年兔肌腱细胞。
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