南极细菌Alteromonas stellipolaris LMG 21856黑色素合成通路分析

来源 :2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen2591272
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  黑色素(Melanin)是一类结构复杂的多酚类杂聚物,广泛存于细菌,真菌以及高等生物的生物体内.黑色素具有电子传递、抗紫外线辐射,抗氧化,抗逆环境、抗重金属毒害、预防免疫和提高病原菌毒力等多种生理功能,在农业生产、医药研发、食品添加剂和化妆品以及生物材料等方面都有着广泛的应用.Alteromonas stellipolaris LMG 21856菌株是从南大洋海水中分离的一株耐低温,高产黑色素的革兰氏阴性寡营养细菌.全基因测序及KEEG代谢通路分析发现,菌株LMG 21856利用尿黑酸合成通路合成黑色素,通路中存在黑色素合成的关键酶-4-羟基苯丙酮酸加双氧酶(HPPD).表达HPPD蛋白的重组E.coli产生红棕色水溶性色素,且随着培养时间的延长颜色不断加深,最终呈现红褐色,这一现象与菌株LMG 21856的黑色素产生过程相似.紫外-可见分光光度计全波长扫描检测发现,表达HPPD蛋白的E.coli和菌株LMG21856的发酵液具有相同的吸收光谱,且和尿黑酸标准品的吸收光谱吻合.HPLC检测结果显示,表达HPPD蛋白的E.coli菌和菌株LMG21856发酵液上清液与尿黑酸标准品洗脱时间一致.薄层层析分析表明,表达HPPD的E.coli和菌株LMG21856培养液均能层析出三角型色素带.
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