【摘 要】
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目的:本研究以骨髓间充质干细胞MAPCs为研究对象,通过体外培养过程中氧化低密度脂蛋白ox-LDL的干预,观察其对MAPCs增殖、干细胞表面标志Oct-4表达和内皮分化的影响,并从氧化应激水平及细胞信号传导通路方面探讨ox-LDL对MAPCs生物学行为影响的机制。方法:将体外培养MAPCs的分为四个实验组:Ox-LDL组、阴性对照组、Ox-LDL+NAC组和空白对照组。采用电子顺磁共振技术检测各组
【机 构】
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重庆医科大学儿童医院心血管内科,400014 儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,40001
【出 处】
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第十七届全国小儿心血管疾病学术会议
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目的:本研究以骨髓间充质干细胞MAPCs为研究对象,通过体外培养过程中氧化低密度脂蛋白ox-LDL的干预,观察其对MAPCs增殖、干细胞表面标志Oct-4表达和内皮分化的影响,并从氧化应激水平及细胞信号传导通路方面探讨ox-LDL对MAPCs生物学行为影响的机制。方法:将体外培养MAPCs的分为四个实验组:Ox-LDL组、阴性对照组、Ox-LDL+NAC组和空白对照组。采用电子顺磁共振技术检测各组中氧化应激产物ROS产量;分子生物学技术检测不同实验组干细胞特异表面标记Oct-4蛋白表达量差异、不同组内皮方向分化时不同时间点内皮表面标记vWF、Flk-1和CD31表达情况。结果:从氧化应激活性产物ROS和细胞信号传导通路蛋白Akt两方面对分化的机制进行检测,结果发现正常培养基和加入nLDL后的培养基经过EPR技术检测ROS的产量很低,而经过ox-LDL干预的培养基ROS的产量明显增加,最有意义的是NAC预处理后再经过。x-LDL干预的培养基ROS产量明显降低,而单纯NAC对ROS生成没有影响,该结果与x-LDL对MAPCs的增殖和内皮分化的影响成正相关:而对细胞信号传导蛋白Akt检测发现,ox-LDL干预后细胞组与正常培养组相比,磷酸化Akt表达明显降低,而NAC预处理后在加入。x-LDL干预组的磷酸化Akt表达有所恢复,但仍与正常培养组有显著差别。
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