【摘 要】
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香蕉枯萎病又称黄叶病,是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)侵染引起维管束坏死,导致植株死亡的一种典型土传毁灭性病害,其中病菌4号小种是
【机 构】
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福建省农业科学院植物保护研究所,福建福州 350013
【出 处】
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第四届全国生物入侵大会暨青年创新论坛
论文部分内容阅读
香蕉枯萎病又称黄叶病,是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)侵染引起维管束坏死,导致植株死亡的一种典型土传毁灭性病害,其中病菌4号小种是重要的外来入侵生物.建立一种灵敏可靠的可视化快速检测技术,为防止香蕉枯萎病菌4号小种的传播蔓延、尽早采取防治对策、指导香蕉生产具有重要意义.本研究在大量筛选获得香蕉枯萎病菌4号小种SCAR特异序列的基础上,采用环介导等温扩增(Loop Mediated IsothermalAmplification,LAMP)技术,建立香蕉枯萎病菌4号小种的LAMP可视化快速检测方法.针对SCAR特异序列的6个位点设计4条特异性LAMP引物,通过钙黄绿素显色反应在恒温63℃条件下1小时完成检测.同时对该技术的特异性、灵敏度进行了测试.该检测方法具有很高的特异性,反应体系中除了香蕉枯萎病菌4号小种具有特异性的扩增,产生黄绿色荧光扩增产物外,其他供试菌株均无特异扩增和黄绿色荧光产物产生.该方法的最低检出限为10 fg/25μ l 反应体系.利用可视化LAMP技术和定量PCR对来自海南、广东及福建等地的32个香蕉枯萎病样品进行检测,准确率达到100％.LAMP可视化检测技术具有快速、灵敏、特异性高、操作简便的优势,为防止香蕉枯萎病菌4号小种的传播蔓延及病害防控提供了一种良好的技术支持.
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