【摘 要】
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目的：我们前期研究发现电磁脉冲(Electromagnetic pulse,EMP)辐照后大鼠血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)体外模型通透性明显增加,并且伴有BBB紧密连接蛋白ZO-1蛋白水平
【机 构】
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第四军医大学军事预防医学院放射医学教研室,陕西 西安 710032
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目的：我们前期研究发现电磁脉冲(Electromagnetic pulse,EMP)辐照后大鼠血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)体外模型通透性明显增加,并且伴有BBB紧密连接蛋白ZO-1蛋白水平的明显降低。据文献报道,明胶酶可通过降解紧密连接蛋白影响BBB的通透性。本研究拟通过观察EMP辐照后BBB体外模型中明胶酶(MMP-2和MMP-9)的蛋白表达和活性变化,探讨明胶酶在EMP致BBB体外模型通透性增加中的作用。方法：通过大鼠脑微血管内皮细胞及星形胶质细胞的原代培养并将两种细胞进行transwell小室半接触式共培养建立体外BBB模型。一定强度EMP (200kV/m、400次脉冲)辐照后于不同时间点(1h、2h、4h、8h和12h)分别收集培养上清和细胞。明胶酶谱法检测培养上清中明胶酶的活性；蛋白杂交法检测细胞中明胶酶MMP-2,MMP-9及其内源性明胶酶抑制物TIMP-1,TIMP-2的蛋白水平。结果：与假辐照组相比,EMP辐照后MMP-2和MMP-9的蛋白水平显著增加,其中MMP-9在辐照后4h达到高峰,8h开始恢复,MMP-2在辐照后4h达到高峰,MMP-9内源性抑制物TIMP-1在辐照后4h稍有增加,MMP-2内源性抑制物TIMP-2在EMP辐照后变化不明显。明胶酶谱结果显示,EMP辐照后4h,明胶酶活性显著增高,与我们前期观察到的EMP辐照后BBB体外模型通透性增加和ZO-1蛋白水平降低的研究结果在时间上是一致的。结论：上述研究结果提示：明胶酶MMP-2和MMP-9可能通过降解BBB体外模型紧密连接相关蛋白ZO-1参与EMP致BBB通透性改变的作用机制,具体机制还待进一步研究。
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