【摘 要】
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在分析了多种艾美耳球虫18S rDNA序列的基础上,设计一对艾美耳属球虫(Eimeria)的通用引物,分别对鹅艾美耳球虫(E.anseris)、赫尔曼艾美耳球虫(E.hermani)、多斑艾美耳球
【机 构】
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扬州大学,兽医学院,江苏,扬州 225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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在分析了多种艾美耳球虫18S rDNA序列的基础上,设计一对艾美耳属球虫(Eimeria)的通用引物,分别对鹅艾美耳球虫(E.anseris)、赫尔曼艾美耳球虫(E.hermani)、多斑艾美耳球虫(E.stigmosa)和金黄艾美耳球虫(E.fulva)18S rDNA部分序列进行PCR扩增、克隆和测序,并用DNAstar软件对这4种鹅球虫与1 5种艾美耳球虫的18S rDNA序列进行同源性分析,最后以火鸡组织滴虫为外类群,采用邻接法构建了4种鹅球虫与29种艾美耳亚目原虫的18S rDNA序列系统进化树.同样,用一对艾美耳属球虫ITS rDNA序列的通用引物,分别对鹅艾美耳球虫、赫尔曼艾美耳球虫、多斑艾美耳球虫、金黄艾美耳球虫ITS rDNA序列进行PCR扩增、克隆和测序,并用DNAstar软件对这4种鹅球虫的ITS rDNA序列进行同源性分析,最后以火鸡组织滴虫为外类群,采用最大简约法分别构建4种鹅球虫的ITS全序列进化树以及与其它多种不同艾美耳亚目原虫的ITS全序列、ITS-1序列、ITS-2序列的系统进化树.结果显示,鹅艾美耳球虫、赫尔曼艾美耳球虫、多斑艾美耳球虫和金黄艾美耳球虫的18S rDNA部分序列长度分别为1695 bp、1696 bp、1703 bp、1694 bp.虫种间的相似性以4种鹅球虫最高,其次为鹅球虫与鹤源艾美耳球虫.在系统发育树中,艾美耳属球虫与成囊类球虫各形成一个单系分支；锦鲤的艾美耳球虫与其他动物的艾美耳球虫形成姊妹群关系；湿地鸟类的艾美耳球虫聚合为一分支,鸡形目和哺乳类动物的艾美耳球虫形成另一分支.鹅艾美耳球虫、赫尔曼艾美耳球虫、多斑艾美耳球虫和金黄艾美耳球虫的ITSrDNA序列长度分别为1051 bp、1000 bp、926bp、1073bp.4种鹅球虫5.8S序列相似性最高,ITS-1序列相似性最低,ITS全序列及ITS-2序列相似性相近.从4种鹅球虫的ITS全序列进化树来看,形态学具有一定相似性的鹅球虫同样表现出在进化关系上的亲近性,而其它三个进化树并不能很好的描述不同动物源球虫之间的进化关系.本研究提示18S rDNA与ITS rDNA序列可用于鹅球虫的分类鉴定与系统进化分析.
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