高温胁迫下瓜实蝇的内参基因筛选

来源 :中国昆虫学会2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dark709
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  为筛选出瓜实蝇雌成虫在高温胁迫下在实时荧光定量PCR中表达稳定的内参基因.本文基于实时荧光定量PCR技术测定了瓜实蝇雌成虫GAPDH、SD、β-TUB、ACT和RPL13共5个备选内参基因在3个不同温度处理25℃(ck)、37℃和45℃下处理1h的mRNA水平表达情况,并借助Bestkeeper、Normfinder和GeNorm 3种程序分析5个备选内参基因表达的稳定性.筛选得出BestKeeper: SD值排序SD (0.06) =GAPDH (0.06) <RPL13 (0.11)<β-TUB (0.15) <ACT (0.23); Normfinder:稳定值排序SD (0.004)=RPL13 (0.004)< GAPDH (0.005) <β-TUB (0.006) <ACT (0.010); GeNorm:M值排序SD (0.011)=RL13 (0.011) =GAPDH (0.011) <β-TUB (0.012) <ACT (0.016).综合以上分析结果,选定SD和RPL13为最稳定的内参基因.本文结果可为深度开展高温胁迫下瓜实蝇其它基因的表达情况研究提供参照.
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