论文部分内容阅读
目的:观察慢病毒载体介导短发夹状RNA(shRNA)靶向沉默RYBP基因对白血病细胞系HL-60细胞增殖与凋亡的影响,初步探讨RYBP基因在白血病发生中的作用。方法:RYBP基因特异性shRNA慢病毒载体包装成慢病毒感染HL-60细胞,同时设空载体和非特异性shRNA慢病毒对照组,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达以监测感染效率,经嘌呤霉素(终浓度8μg/ml)筛选出稳定感染细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测HL-60细胞RYBP基因mRNA和蛋白的表达;CCK-8法测定细胞增殖情况;An-nexin V-PE/7-AAD染色后流式细胞术检测凋亡率。